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分享一些關于前處理96孔板鋪板的小技巧

發布時間:2021-05-24   點擊次數:234次
  剛開始用前處理96孔板種細胞時細胞總是分布不均勻,第二天就會發現有些地方出現堆積性生長,而還有不少地方細胞則很稀疏,細胞密集的地方因細胞與細胞之間的接觸抑制影響細胞的生長,這樣就很難評價干預因素對細胞的作用,因此將前處理96孔板種均勻也是進行后續實驗的前提,將我以前用的老辦法和最后用的新方法比較一下,以讓大家看看各自優缺。

 

  1、老方法:種過板子后,用手將前處理96孔板平拿起,左右晃動幾下,然后再前后晃動幾下,不過這種方法5個復孔中總有2-3個孔中細胞分布不均勻,多數情況下是孔的中間出現成堆分布,為此苦惱了一陣子。還又一次見一師姐將種好的板子放在搖床上搖了幾分鐘,結果更慘了,細胞全部跑到中間了。
  一般前處理96孔板我每孔是加100微升細胞懸液,從孔的左邊靠近底部加入,加完半邊板后,將未加的細胞懸液混一下再,繼續加剩余的半邊板子,都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度,太強或次數太多會導致細胞集中成堆,將板順時針旋轉(逆時針效果不好),依次敲擊剩余三個邊,靜置約5分鐘,放入37度培養箱。
 
  2、新方法:這種方法簡直是太好了,種的很均勻。先用移液槍將吹打均勻的細胞吸起來,讓后將槍頭緊貼著孔的一側壁,然后將槍頭中的細胞緩緩的打下去,種好之后千萬不要搖晃板子,直接放到顯微鏡下看就可以了,此方法可以說是100%的有效吧。 希望對大家有幫助。
  補充:從6孔板到96空板要細胞分散均勻,先用培養基把細胞稀釋好,再把培養板放在適當的位置,加入細胞時和加入細胞后不移動培養板;如果空中有的地方沒有培養基可吹打,但不要移動培養板,加入細胞后靜置20-30分鐘再移入培養箱。這樣細胞一般都能長的很均勻。當然,前提是細胞消化的很好。

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